Sterilni substrati so sestavljeni iz žitnega zrnja z optimalno vsebnostjo vlage, predhodno steriliziranega z visoko temperaturo in pritiskom. Substrati se nahajajo v vrečkah ali steklenih kozarcih. Vanje v aseptičnih pogojih nanesemo kulturo ali spore glive, jih inkubiramo, da le-ta popolnoma preraste žitno zrnje, nato pa uporabimo za gojenje gob na končnih substratih. Nekatere vrste gob lahko poženejo direktno iz substrata tako, da je nanašanje na končne substrate popolnoma nepotrebno.